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2×SYBR qPCR预混液(无ROX)图片
产品货号:
M20063
中文名称:
2×SYBR qPCR预混液(无ROX)
英文名称:
2X SYBR Green qPCR MasterMix(No ROX)
产品规格:
100T|500T|2000T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的一种2×浓度的预混型试剂,适合Real-Time PCR的Buffer组合,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高PCR的扩增效率,适合进行高灵敏度的Real-Time PCR扩增反应。本制品适用于快速Real-Time PCR扩增反应,可以在宽广的定量区间内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确的定量检测,重复性好,可信度高。


本制品预先混有热启动Taq DNA聚合酶、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料、稳定剂和镁离子等通用组分,只需加入模板、引物、双蒸馏水便可进行Real-Time PCR反应,操作简单方便。本品不含有ROX Reference Dye,适用于无需校正孔间荧光信号误差的仪器。




Bio-Rad:CFX96,CFX384,iCycler IQ,MyiQ,iQ5,MiniOpticon,Opticon,Opticon 2 and 4;
Eppendorf:Mastercycler ep realplex,realplex2 s;
Qiagen:Corbett Rotor-Gene Q,Corbett Rotor-Gene 3000,Corbett Rotor-Gene 6000;
Roche:LightCycler 480,LightCycler 2.0;LightCycler 96;
Thermo Scientific:PikoReal Cycler;Cepheid:SmartCycler;Illumina:Eco qPCR.


组分100T500T2000T
2×SYBR qPCR预混液(无ROX)1mL5×1mL20×1mL
说明书1份

保存:-20℃,避光,避免反复冻融,有效期1年。


  • 使用前,请上下轻轻颠倒混匀,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成反应效果不佳。
    • 请勿涡旋振荡混匀。
    • 2×SYBR qPCR预混液(无ROX)在-80℃存放可能会产生白色或淡黄的沉淀,用手握缓慢溶解,于室温短时间避光放置,轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。
    • 沉淀会导致溶液成分不均匀,使用前务必充分混匀试剂。
  • 配制反应液时,试剂请于冰上放置。
  • 本制品中含有荧光染料SYBR Green I,配制PCR反应液时避免强光照射。
  • 反应液的配制、分装请一定使用新(无污染)枪头、Microtube等,避免污染。
  • 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



  • 配置反应体系
    建议的模板量为10~100ng (基因组DNA)或1~10ng (cDNA模板)。推荐使用反转录试剂盒合成DNA模版,以有效去除RNA样品中残留的基因组。
    成分20μL体系50μL体系终浓度
    2×SYBR qPCR预混液(无ROX)10μL25μL
    PCR Forward Primer (10μM)0.4μL1μL0.2μM
    PCR Reverse Primer (10μM)0.4μL1μL0.2μM
    DNA模板2μL4μL
    ddH2O (双蒸馏水)7.2μL19μL
    Total20μL50μL
    • 通常引物终浓度为0.2μM可以得到较好结果。反应性能较差时,可以在0.1~1.0μM范围内调整引物浓度。
    • 在20μL反应体系中,DNA模板的添加量通常在100ng以下。因不同种类的DNA模板中含有的靶基因的拷贝数不同,必要时可进行梯度稀释,确定合适的DNA模板添加量。
    • 按照各仪器推荐体系进行反应液配制。
  • 进行Real-Time PCR反应
    建议采用下列图表显示的两步法PCR反应程序,如果该程序得不到良好的实验结果时,再进行PCR条件的优化。由于使用Tm值较低的引物等原因,两步法PCR反应扩增性能较差时,可以尝试进行三步法PCR扩增反应。
    两步法PCR反应三步法PCR反应
    步骤温度时间循环数步骤温度时间循环数
    热启动95℃5min1热启动95℃5min1
    变性95℃10sec40变性95℃10sec40
    退火/延伸60℃30sec退火55~60℃20sec
    熔解曲线95℃15sec1延伸72℃20sec
    60℃60sec熔解曲线95℃15sec1
    95℃15sec60℃60sec
    95℃15sec
    • 预变性时间:根据不同模版和引物的具体情况可适当缩短至2min;
    • 退火温度和时间:根据引物和目的基因的长度进行调整;
    • 熔解曲线:通常情况下可以使用仪器默认程序。

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